半胱氨酸(Cys)測試盒的操作過程

( Cysteime Kit 法)

一、測定原理

Cys 還原磷鎢酸生成鎢藍(lán)，在600nm 處有吸收峰:通過600nm 吸光度，計算Cys 含量。

二、儀器設(shè)備及需自備試劑

可見光分光光度計、低溫離心機(jī)、微量移液槍、磷酸和蒸溜水

三、試劑組成:(50T/48 樣)

試劑一:液體x1 瓶，4℃保存。

試劑二:液體x1 瓶，4℃保存

試劑三:粉劑x1 瓶,4℃保存。提前一天向試劑三中加5ml蒸留水充分溶解,再加磷酸1.25ml,

混勻后蓋緊(防止水分散失) 沸水浴2h; 冷卻后加20mI蒸餾水，4℃保存2周

標(biāo)準(zhǔn)品:1umol/ml 標(biāo)準(zhǔn)液x1 瓶，4℃保存。

四、操作步驟

1.半胱氨酸提取：

樣本提取詳見試劑盒內(nèi)說明書。測定組織和細(xì)胞同時需要測定蛋白濃度。可用本所的

A045-2總蛋白定量測試盒（考馬斯亮藍(lán)法）或者A045-3、A045-4總蛋白定量測試盒 (BCA

法)進(jìn)行蛋白濃度的測定。

2. 操作表

 半胱氨酸(Cys)測試盒的操作過程